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      负染色是利用高密度的重金属盐（如磷钨酸、醋酸铀等），把微小的生物标本包围起来，在黑暗的背景上，样本的微细结构呈现阴性反差。所以负染色所显示的电镜图像，正好与超薄切片正染色相反，其样本结构为透明浅色，而背底则为无结构的灰色或黑色。负染色样本不需经过固定、脱水、包埋和超薄切片等操作，而是直接对沉降的样本匀浆悬浮液进行染色。操作简便，溶液使用量少，省时快速，分辨力高。

      负染色技术已是当代电镜生物标本制备中一项应用普遍、效力较高而又比较简便的技术，尤其在病毒学研究中，对揭示病毒的形态结构十分有效，对病毒学的发展起了较大的作用。负染色技术可用于细菌、病毒、蛋白等大分子结构及生物囊泡等研究工作。特别是在病毒性致病因子的超微病理诊断中，广泛应用。

      负染色方法有如下突出的优点：明显提高了标本的反差和分辨力。简便易行，不要求高纯度的标本制备。染色本身不改变生物标本的活性，不因染色而造成标本变形。

负染色法主要有两种：

      (1) 悬滴法：用一根细滴管或结核菌素注射器吸一滴标本悬液滴在有膜的铜网上，如带膜铜网已从滤纸上取下，则此铜网很可能被吸到加标本的吸管头上或注射器针头上，铜网上也可能被翻转而污染，故采用悬滴法时，应将带膜铜网粘附于滤纸上，切不可取下。铜网滴上标本后静置片刻，然后用滤纸从铜网边上吸去多余的标本悬液，未待标本干燥即滴上负染色液。染色 1~2 min, 用滤纸吸去多余染液，再用蒸馏水滴在铜网上洗 1~2次，再用滤纸吸去水分，待干后用电镜观察。

      (2) 漂浮法：漂浮法是将有膜的铜网的膜面覆盖漂浮于标本悬液上。具体方法是先将滤纸在加温熔化的液体石蜡中浸渍后取出，干后即成带蜡滤纸。用吸管吸取标本悬液滴于蜡滤纸上，将带膜铜网覆盖其上， 1~2 min 后用镊子夹起铜网，用滤纸吸去多余的标本悬液，在另一蜡纸上滴一点负染色，将吸有标本的铜网膜面向下漂浮于负染色液滴上，染 1~2 min, 用镊子夹起铜网，用滤纸吸去多余的染液，待干后用电镜观察。